国内精品自产拍在线观看,狠狠色综合网久久久久久,かしこまりました中文在线,锕锕锕锕锕锕锕WWW在线观看

網(wǎng)站首頁  ◇  技術(shù)支持  ◇  瓊脂糖凝膠電泳遷移速率的影響因素
瓊脂糖凝膠電泳遷移速率的影響因素
  • 發(fā)布日期:2021-08-26     信息來源:      瀏覽次數(shù):4754
    • 那么下面上海嘉鵬科技有限公司為大家簡單介紹一下關(guān)于瓊脂糖凝膠電泳注意事項及操作流程:

      1、 DNA的分子大小及構(gòu)型:

      不同構(gòu)型DNA的移動速度次序為:共價閉環(huán)DNAcovalently closed circular,cccDNA>直線DNA>開環(huán)的雙鏈環(huán)狀DNA。線狀雙鏈DNA分子在一定濃度瓊脂糖凝膠中的遷移速率與DNA分子量對數(shù)成反比,分子越大則所受阻力越大,也越難于在凝膠孔隙中蠕行,因而遷移得越慢。當(dāng)瓊脂糖濃度太高時,環(huán)狀DNA(一般為球形)不能進入膠中,相對遷移率為0Rm=0),而同等大小的直線雙鏈DNA(剛性棒狀)則可以長軸方向前進(Rm>0),由此可見,這三種構(gòu)型的相對遷移率主要取決于凝膠濃度。

       

      2、 瓊脂糖濃度:

      一個給定大小的線狀DNA分子,其遷移速度在不同濃度的瓊脂糖凝膠中各不相同。DNA電泳遷移率的對數(shù)與凝膠濃度成線性關(guān)系。凝膠濃度的選擇取決于DNA分子的大小。分離小于0.5kbDNA段所需膠濃度是 1.2-1.5%,分離大于10kbDNA分子所需膠濃度為0.3-0.7%,DNA段大小間于兩者之間則所需膠濃度為0.8-1.0%

       

      3、 DNA分子的構(gòu)象 

      當(dāng)DNA分子處于不同構(gòu)象時,它在電場中移動距離不僅和分子量有關(guān),還和它本身構(gòu)象有關(guān)。相同分子量的線狀、開環(huán)和超螺旋DNA在瓊脂糖凝膠中移動速度是不一樣的,超螺旋DNA移動*快,而線狀雙鏈DNA移動*慢。如在電泳鑒定質(zhì)粒純度時發(fā)現(xiàn)凝膠上有數(shù)條DNA帶難以確定是質(zhì)粒DNA不同構(gòu)象引起還是因 為含有其他DNA引起時,可從瓊脂糖凝膠上將DNA帶逐個回收,用同一種限制性內(nèi)切酶分別水解,然后電泳,如在凝膠上出現(xiàn)相同的DNA圖譜,則為同一種 DNA。

       

      4、 電源電壓 

      瓊脂糖凝膠分離大分子DNA實驗條件的研究結(jié)果表明,在低濃度、低電壓下,分離效果較好。在低電壓條件下,線性DNA分子的電泳遷移率與所用的電壓呈正比。但是,在電場強度增加時,不同分子量的DNA段的遷移率將以不同的幅度增長,片段越大,因場強升高引起的遷移率升高幅度也越大,因此電壓增加,瓊脂糖凝膠的有效分離范圍將縮小。要使大于2kbDNA段的分辨率達到*大電場強度不宜高于5V/cm。

       

      5、 嵌入染料的存在 

      熒光染料溴化乙啶用于檢測瓊脂糖凝膠中的DNA,染料會嵌入到堆積的堿基對之間并拉長線狀和帶缺口的環(huán)狀DNA,使其剛性更強,還會使線狀DNA遷移率降低15%。

       

      6、 離子強度影響 

      電泳緩沖液的組成及其離子強度影響DNA的電泳遷移率。在沒有離子存在時(如誤用蒸餾水配制凝膠),電導(dǎo)率*小,幾乎不移動,在高離子強度的緩沖液中(如誤加10×電泳緩沖液),則電導(dǎo)很高并明顯產(chǎn)熱,嚴(yán)重時會引起凝膠熔化或DNA變性。 對于天然的雙鏈DNA,常用的幾種電泳緩沖液有TAE[EDTA (pH8.0)Tris-乙酸],TBE(Tris-硼酸和EDTA),TPE(Tris-磷酸和EDTA),一般配制成濃縮母液,儲于室溫。

       

      以上就是上海嘉鵬科技有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于瓊脂糖凝膠電泳注意事項及操作流程。

       

      我們上海嘉鵬科技有限公司是專業(yè)生產(chǎn)超微量核酸蛋白測定儀、化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)、凝膠成像分析系統(tǒng)、紫外分析儀、核酸蛋白檢測儀、紫外檢測儀、蛋白質(zhì)分離純化系統(tǒng)、光化學(xué)反應(yīng)儀、旋渦混合器、恒流泵、自動部分收集器等十幾個系列產(chǎn)品的廠家,歡迎大家前來訂購


    WWW性久久久COM| 亚洲AV自慰白浆喷水网站少妇| 天黑黑影院免费观看视频在线播放| 亚洲熟妇无码另类久久久| 黑人巨大精品欧美一区二区免费 | 超清精品丝袜国产自在线拍| 国产精品久久久久久久免费a片| 午夜精品一区二区三区免费视频| 无人高清视频完整版在线观看| 年轻漂亮岳每4观看| 国产无套内射又大又猛又粗又爽 | 永久免费精品精品永久-夜色| 成人做爰免费视频免费看| 冠希实干阿娇13分钟视频在线| 欧美大成色WWW永久网站婷| 色欲综合久久躁天天躁蜜桃| 精品人妻无码专区在中文字幕| 久久精品国产99国产精偷| 中文字幕AV人妻一区二区 | 国产V亚洲V天堂A无码| 免费sm羞辱调教视频网站| 久别的草原在线影院观看中文 | 男男黄gay片免费网站www| 丰满欧美大爆乳性猛交| 狠狠综合久久av一区二区| 最近最新手机中文大全4| 大学生疯狂高潮呻吟免费视频| 国产又色又爽无遮挡免费| 日本动态120秒免费| 国产精品户外野外| 99精产国品一二三产区区| 国产免费久久精品国产传媒| 国产95在线 | 欧美| 中文字幕精品一区二区精品| a片做爰片仑理片免费看| 国产精品亚洲av无人区一区| 2012国语高清完整版在线观看| 日韩精品成人无码专区免费 | 国产在线精品一区二区三区不卡 | 亚洲精品TV久久久久久久久| 国产网红女主播精品视频|