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電泳Marker問題集錦
  • 發(fā)布日期:2021-08-23     信息來源:      瀏覽次數(shù):3657
    • 那么下面上海嘉鵬科技有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下關(guān)于電泳Marker問題集錦:

      Q:為什么marker條帶非常模糊,無法辨別具體條帶? 

      A:出現(xiàn)上述情況,可能有以下幾個(gè)原因: 

      1. marker條帶出現(xiàn)了降解。請(qǐng)確保在使用過程中避免核酸酶污染; 

      2.  電泳緩沖液陳舊。電泳緩沖液多次使用后,離子濃度降低,pH值上升,緩沖能力減弱,從而影響電泳效果,建議經(jīng)常更換電泳緩沖液;

      3.  電泳條件不合適。電泳時(shí)電壓應(yīng)不超過20V/cm,溫度應(yīng)低于30℃;

      4. marker上樣量過多。請(qǐng)根據(jù)說明書選用合適上樣量;

      5. 凝膠質(zhì)量不好。建議使用質(zhì)量較好的瓊脂糖;此外,凝膠凝固不均勻也會(huì)導(dǎo)致條帶模糊。 

       

      Q:為什么marker條帶出現(xiàn)不規(guī)則的條帶(如啞鈴狀等)? 

      A:出現(xiàn)上述情況,多與以下幾個(gè)原因有關(guān): 

      1.  電泳緩沖液陳舊。老化的電泳緩沖液離子濃度降低,pH值上升,緩沖能力減弱,從而影響電泳效果,建議經(jīng)常更換電泳緩沖液;

      2.  電泳條件不合適。電泳時(shí)電壓應(yīng)不超過20V/cm,電壓太高可能也會(huì)導(dǎo)致marker條帶出現(xiàn)不規(guī)則現(xiàn)象。此外,凝膠質(zhì)量差以及凝膠冷卻時(shí)凝固不均勻也會(huì)導(dǎo)致該現(xiàn)象出現(xiàn)。 

       

      Q:為什么marker條帶非常弱或者根本沒有條帶? 

      A:出現(xiàn)上述情況可能是:

      1. marker上樣量較低,可適當(dāng)增加上樣量;

      2. 凝膠質(zhì)量較差或凝膠凝固不均勻也會(huì)導(dǎo)致電泳條帶弱或根本沒有條帶;

      3. 電泳時(shí)間過長(zhǎng)導(dǎo)致marker條帶跑出凝膠,可縮短電泳時(shí)間,降低電壓,增加凝膠濃度。 

       

      Q:為什么marker缺帶? 

      A:對(duì)于含有較小片段的marker,如果出現(xiàn)缺帶現(xiàn)象,可能是因?yàn)椋?/p>

      1.小條帶跑出凝膠或分子量大小非常相近的條帶不易辨認(rèn)所致,可適當(dāng)縮短電泳時(shí)間,降低電壓,同時(shí)增加凝膠濃度;

      2.凝膠中EB含量過低,導(dǎo)致大片段結(jié)合EB量太少或沒有,在紫外光下亮度太低,可適當(dāng)增加EB用量。

       

      以上就是上海嘉鵬科技有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于電泳Marker問題集錦。

       

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