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瓊脂糖凝膠電泳涉及的步驟
  • 發(fā)布日期:2021-05-11     信息來源:      瀏覽次數(shù):2361
    • 那么下面上海嘉鵬科技有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下關(guān)于瓊脂糖凝膠電泳涉及的步驟:

       為了制備凝膠,將瓊脂糖粉與電泳緩沖液混合至所需濃度,并在微波爐中加熱使其熔化。

      瓊脂糖凝膠濃度

      1. 所用瓊脂糖的百分比取決于要分離的片段的大小。

      2. 瓊脂糖的濃度是指瓊脂糖相對(duì)于緩沖液體積的百分比(w / v),瓊脂糖凝膠通常在0.2%至3%的范圍內(nèi)。

      3. 瓊脂糖濃度越低,DNA片段遷移越快。

      4. 通常,如果目的是分離大的DNA片段,則應(yīng)使用低濃度的瓊脂糖,如果目的是分離小的DNA片段,則建議使用高濃度的瓊脂糖。

      將溴化乙錠添加到凝膠中(**終濃度為0.5 ug / ml),以促進(jìn)電泳后DNA的可視化。

      將溶液冷卻至約60°C后,將其倒入裝有樣品梳子的澆鑄盤中,使其在室溫下固化。

      凝膠固化后,將梳子移開,注意不要撕裂孔的底部。

      仍在塑料托盤中的凝膠水平插入電泳儀并用緩沖液覆蓋。

      然后將含有DNA與上樣緩沖液混合的樣品吸移到樣品孔中,將蓋子和電源線放在設(shè)備上,并施加電流。

      可以通過觀察電極上的氣泡確認(rèn)電流。

      鑒于其負(fù)電荷,DNA將遷移至通常為紅色的正電極。

      . DNA遷移到凝膠中的距離可以通過肉眼監(jiān)測(cè)跟蹤染料(如溴酚藍(lán)和二甲苯氰染料)的遷移來判斷。

       

      以上就是上海嘉鵬科技有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于瓊脂糖凝膠電泳涉及的步驟。

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