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化學(xué)發(fā)光凝膠成像伴隨著冷CCD技術(shù)發(fā)展壯大
  • 發(fā)布日期:2021-02-24     信息來(lái)源:      瀏覽次數(shù):1580
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             化學(xué)發(fā)光也就是化學(xué)法剛分析法,分子發(fā)光光譜分析法中的一類,它主要是依據(jù)化學(xué)檢測(cè)體系中待測(cè)物濃度與體系的化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度在一定條件下呈線性定量關(guān)系的原理,利用儀器對(duì)體系化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度的檢測(cè),而確定待測(cè)物含量的一種痕量分析方法。化學(xué)發(fā)光與其它發(fā)光分析的本質(zhì)區(qū)別是體系產(chǎn)生發(fā)光(光輻射)所吸收的能量來(lái)源不同。體系產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光,必須具有一個(gè)產(chǎn)生可檢信號(hào)的光輻射反應(yīng)和一個(gè)可一次提供導(dǎo)致發(fā)光現(xiàn)象足夠能量的單獨(dú)反應(yīng)步驟的化學(xué)反應(yīng)。

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      化學(xué)發(fā)光Western雜交檢測(cè),是同位素檢測(cè)的一種高度靈敏的替代方法。酶標(biāo)記抗體取代了放射性標(biāo)記抗體,當(dāng)它作用于底物時(shí),可產(chǎn)生光信號(hào)。多數(shù)特異抗原檢測(cè)方法以辣根過(guò)氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶(AP)二級(jí)抗體耦聯(lián)物為基礎(chǔ)。信號(hào)可通過(guò)感光膠片或?qū)的成像設(shè)備來(lái)采集。化學(xué)發(fā)光底物用于mianyi印跡技術(shù)已有十幾年的歷史,目前大部分實(shí)驗(yàn)室做轉(zhuǎn)印時(shí)都會(huì)采用化學(xué)發(fā)光技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。

      隨著冷CCD化學(xué)發(fā)光檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展,現(xiàn)在越來(lái)越多的實(shí)驗(yàn)室都開(kāi)始采用冷CCD的凝膠成像系統(tǒng)進(jìn)行化學(xué)發(fā)光的檢測(cè),膠片成像雖然比自然發(fā)光法靈敏度更高,但也有很多缺點(diǎn):耗時(shí),需要暗房,顯影劑和膠片,膠片較貴且為需持續(xù)購(gòu)買的消耗品。同時(shí)由于膠片的線性范圍較窄,因此用膠片上的條帶(特別是表達(dá)量較低的條帶)進(jìn)行定量幾乎不可能。冷CCD技術(shù)與X膠片相比具有瞬時(shí)影像處理、高靈敏度和高分辨率、動(dòng)力范圍廣等優(yōu)點(diǎn),因此能對(duì)條帶進(jìn)行**定量。當(dāng)然這項(xiàng)技術(shù)要求底物能產(chǎn)生高強(qiáng)度長(zhǎng)持續(xù)時(shí)間的信號(hào),以保證信號(hào)能被冷CCD的凝膠成像系統(tǒng)捕獲。

       

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